exosome是直径约为30-150 nm的小囊泡，天然存在于所有体液中，包括血液、唾液、尿液和母乳中，它含有完整的DNA信息，在细胞间的信息传递上起着重要的作用。
具体来说，exosome的研究方式是分离/捕获小囊泡，并拷问它所携带的货物。就目前而言，人们多采用超速离心、磁珠免疫捕获、沉淀或过滤的方法，对exosome进行前期的分离。之后利用电镜来分析其大小和形态，利用流式细胞仪来分析细胞表面标记，通过Western blot和ELISA等方法对蛋白进行分析，或通过qPCR和新一代测序（NGS）来分析RNA。
在分离exosome时，约有56%的人采用超速离心法，但此种方法有耗时耗力，需要90000g的大型超速离心机，耗时长，往往需要5-8个小时，产量较低，需样本量较大等缺点；
目前Qiagen推出提取exosome的exoRNeasy系列试剂盒，取代了传统的超速离心法，可快速高效的分理出exosome及exosome中的总RNA。
exoRNeasy系列试剂盒特点如下：
l 亲和膜技术，无需沉淀或超速离心
l exoRNeasy可在1h内从高达4ml的血清血浆或32ml的细胞上清液等样本中分离exosome中的总RNA（包含miRNA）
l exoEasyMaxi可在25分钟内从高达4ml的血清血浆或32ml的细胞上清液等样本中分离exosomes
l 大体积上样保证收集到更多exosome，提高下游检测灵敏度
在下游分析方面，36%的研究人员通过Western blot或其他方法来鉴定蛋白，29%的人员利用qPCR对microRNA表达谱进行分析，9%利用芯片进行microRNA表达谱分析。同时，新一代测序的用户也不少，13%的人员利用NGS开展microRNA/小RNA研究，9% 开展mRNA研究。
目前Qiagen有通过qPCR检测exosome中的mRNA、miRNA及lncRNA的试剂盒。这些试剂盒专为real-time PCR分析而设计，已经过实验验证。严格的实验验证标准保证PCR的特异性和高效性，在基因表达分析中获得可靠、准确的结果。
Exosome研究相关产品
产品 | 用途 | 货号 |
exoRNeasy Serum/Plasma Maxi Kit（50） | 纯化血清/血浆样本中exosome及exosome中RNA(含miRNA) | 77064 |
exoRNeasy Serum/Plasma Maxi Kit（50） | 77044 | |
exoRNeasy Serum/Plasma Starter Kit（20） | 77023 | |
exoEasy Maxi Kit（20） | 77064 | |
miScript II RT Kit（12） | 检测exosome中miRNA | 218160 |
miScript Primer Assay（100） | 218300 | |
miScript SYBR® Green PCR Kit（200） | 218073 | |
miRNeasy Serum/Plasma Spike-In Control | 219610 | |
RT2 First Strand Kit（12） | 检测exosome中lncRNA | 330401 |
RT2 SYBR® Green Mastermix（2） | Varies | |
RT2 lncRNA qPCR Assay（200） | 330701 | |
RT2 First Strand Kit（12） | 检测exosome中mRNA | 330401 |
RT2 SYBR® Green Mastermix（2） | Varies | |
RT2 qPCR Primer Assay (200) | 330001 |
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